ISSN 1866-8836
Клеточная терапия и трансплантация

Восстановление Т-клеток памяти у больных острыми лейкозами после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток при использовании альтернативных схем профилактики острой реакции трансплантат против хозяина (оРТПХ)

Наталья Н. Попова, Михаил Ю. Дроков, Елена Н. Паровичникова, Лариса А. Кузьмина, Юлия О. Давыдова, Николай М. Капранов, Екатерина Д. Михальцова, Ольга М. Королева, Вера А. Васильева, Дарья С. Дубняк, Анна А. Сидорова, Екатерина В. Усикова, Зоя В. Конова, Анна А. Дмитрова, Ирина В. Гальцева, Михаил А. Масчан, Валерий Г. Савченко
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава РФ, г. Москва

Загрузить версию в PDF

Клеточная терапия и трансплантация (КТТ)
Том 7, номер 3
Contents 

Резюме

Введение

Т-клетки памяти представляют собой гетерогенную субпопуляцию иммунных клеток, участвующих в развитии аллоиммунных реакций после алло-ТГСК – реакции трансплантат против опухоли (РТПО) и РТПХ. В настоящее время созданы новые программы иммуносупрессивной терапии, но единого унифицированного подхода профилактики острой РТПХ не существует. Необходимость проведения иммуносупрессии, особенно при несовместимых/гаплоидентичных алло-ТГСК, когда требуется максимальная иммуноаблация, позволяет контролировать развитие/течение РТПХ. Однако необходимость своевременной реконституции иммунной системы является ключевым фактором для реализации противоопухолевого контроля. Цель работы состояла в оценке влияния различных схем профилактики острой РТПХ на восстановление субпопуляций Т-клеток памяти и их предшественников у больных острыми лейкозами после алло-ТГСК.

Материалы и методы

В исследование включены 39 пациентов с острыми лейкозами, которым была выполнена алло-ТГСК в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава РФ. Медиана возраста составила 36 лет (17-60 лет). Альтернативные программы профилактики острой РТПХ использовали при несовместимых/гаплоидентичных алло-ТГСК (n=17), которые включали в себя посттрансплантационный циклофосфамид (ПТ-ЦФ) на +3, +4 день или Тαβ-деплецию у молодых пациентов. В контрольную группу мы включили пациентов с классическим режимом иммуносупрессии (классическая ИСТ) с использованием циклоспорина А в сочетании с микофенолатом мофетилом и малыми дозами метотрексата, применяемых после совместимой родственной/неродственной алло-ТГСК (n=22). Характеристика больных, включенных в исследование, схемы профилактики РТПХ, частота развития острой РТПХ и рецидивов заболевания приведена в таблице 1.

Таблица 1. Характеристика пациентов

38_таблица.png
38_рисунок 1.png

Рисунок 1. Восстановление субпопуляций Т-клеток памяти у больных острыми лейкозами после алло-ТГСК

Примечание. На графике показаны значимые отличия (p<0,005) по количеству клеток в субпопуляциях CD4+/CD8+ Т-клеток памяти при использовании альтернативных режимов профилактики оРТПХ – ПТ-ЦФ или Т-деплеции, в сравнении с классической ИСТ.

Для исследования реконституции субпопуляций Т-клеток памяти использовали нативные образцы перифе-рической крови больных после алло-ТГСК на +30, +60, +90 день. С помощью метода многоцветной проточной цитометрии (BD FACS Canto II, Becton Dickinson, USA) были определены следующие субпопуляции Т-клеток памяти периферической крови: Т-наивные и стволовые клетки памяти (Tnv+Tscm) – CD8+/СD4+ CD45R0-CCR7+CD28+; T-клетки центральной памяти (Tcm) – CD8+/СD4+ CD45R0+CCR7+CD28+; T-клетки тран-зиторной памяти (Ttm) – CD8+/СD4+ CD45R0+CCR7-CD28+; T-клетки эффекторной памяти (Tem) – CD8+/СD4+ CD45R0+CCR7-CD28-; T- терминальные эффек-торы (Tte) – CD8+/СD4+ CD45R0-CCR7-CD28-. Для оценки различий между двумя независимыми выборками использовали U-критерий Манна-Уитни. Значениер<0,05 считали статистически значимым. Весь анализ данных проводили с использованием SPSS ver 23. (IBM, Chicago,Ill., USA).

Результаты

Данные представлены на рисунке 1. Показано, что на +30, +60, +90 день абсолютное количество CD8+ Tnv+Tscm после классической ИСТ было значимо больше, чем после использования ПТ-ЦФ или Тαβ-деплеции. На +30 день абсолютное количество CD8+ Tnv+Tscm после использования классической схемы профилактики РТПХ составило 4,22 кл/мкл (1,21-7,0кл кл/мкл), после ПТ-ЦФ – 0,38 кл/мкл (0,17-0,63 кл/мкл) (p=0,001), после Т-деплеции – 0,14 кл/мкл (0,05-0,15 кл/мкл) (р=0,03). На +60 день – 2,57 кл/мкл (1,49-4,99 кл/мкл) после классической ИСТ; 0,12 кл/мкл (0,02-0,15 кл/мкл) после Т-деплеции; 1,1 кл/мкл (0,72-2,8 кл/мкл) после ПТ-ЦФ (p=0,009). На +90 день – 4,29 кл/мкл (2,08-6,58 кл/мкл) после классического режима; 1,82 кл/мкл (0,16-3,3 кл/мкл) после ПТ-ЦФ; 0,35 кл/мкл (0,01-0,7 кл/мкл) после Т-деплеции (p=0,035). На +30, +60 день абсолютное количество CD8+ Tcm было значимо меньше после использования альтернативных подходов в сравнении с классической ИСТ – на +30 день 1,07 кл/мкл (0,27-1,75 кл/мкл) после классической ИСТ, 0,25 кл/мкл (0,12-0,68 кл/мкл) после ПТ-ЦФ (р=0,032), 0,18 кл/мкл (0,01-0,34 кл/мкл) после Т-деплеции (р=0,036); на +60 день 0,9 кл/мкл (0,65-1,68 кл/мкл), 0,42 кл/мкл (0,33-0,73 кл/мкл), 0,05 кл/мкл (0,01-0,07 кл/мкл) соответственно (р=0,02). Абсолютное количество CD4+ Tnv+Tscm на +30 день было значимо больше после применения классической схемы профилактики РТПХ – 16,1 кл/мкл (2,1-55,0 кл/мкл), в сравнении с использованием ПТ-ЦФ – 1,35 кл/мкл (0,7-5,36 кл/мкл) и Т-деплеции – 0,31 кл/мкл (0,27-0,71 кл/мкл) (р=0,05). Субпопуляция Тtm CD8+ на +60, +90 дни и CD4+ на +30 день отличалась при использовании классической ИСТ и альтернативных режимов (Рисунок 1). Мы не выявили корреляции между числом Tnv+Tscm, Tcm, Ttm, Tem, Tte и развитием оРТПХ или рецидива заболевания.

Заключение

Субпопуляция наивных и стволовых Т-клеток памяти является пулом клеток-предшественников для целого эффекторного звена Т-клеток (Ttm, Tem, Tte), реализующего аллоиммунный ответ. Значимое уменьшение пула CD4+/CD8+ Tnv+Tscm, CD8+ Tcm после использования альтернативных схем профилактики острой РТПХ может свидетельствовать о более глубокой иммуноаблации при этих режимах, используемых при несовместимых/гапло-ТГСК. За счет этого сохраняющееся низкое количество Tnv+Tscm на +60, +90 день, как клеток-предшественников для целой популяции Т-клеток памяти, может свидетельствовать об отсроченной реконституции адаптивного звена иммунного ответа при альтернативных режимах профилактики оРТПХ.

Ключевые слова

Т-клетки памяти, реконституция иммунной системы, трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, профилактика острой РТПХ.


Возврат к списку