ISSN 1866-8836
Клеточная терапия и трансплантация

Поиск прогностических биомаркеров у взрослых пациентов при родственных и неродственных трансплантациях гемопоэтических стволовых клеток с посттрансплантационным циклофосфаном

Иван С. Моисеев 1, Елена В. Бабенко 1, Ольга С. Епифановская 1, Анна А. Доценко 1, Владислав С. Сергеев 1, Елена А. Суркова 2, Дарья А. Кузнецова 2, Сергей В. Лапин 2, Елена И. Дарская 1, Елена В. Морозова 1, Серегй Н. Бондаренко 1, Борис В. Афанасьев 1
1 НИИ Детской Онкологии, Гематологии и Трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский Государственный Медицинский Университет им. И. П. Павлова
2 Лаборатория диагностики аутоиммунных заболеваний, Первый Санкт-Петербургский Государственный Медицинский Университет им. И. П. Павлова

Загрузить версию в PDF

Клеточная терапия и трансплантация (КТТ)
Том 7, Номер 3
Contents 

Резюме

Введение

В настоящий момент существует ряд биомаркеров, которые обладают прогностическим значением в отношении реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ), трансплантационной летальности (ТЛ) и рецидивов основного заболевания. Однако, валидация этих биомаркеров преимущественно выполнялась после классической профилактики РТПХ, включающий ингибитор кальциневрина, метотрексат/микофенолат и антитимоцитарный глобулин при неродственных трансплантациях. Число исследований прогностического значения биомаркеров после посттрансплантационного циклофосфана (ПТЦф) крайне ограничено.

Пациенты и методы

С 2015 по 2016 было проведено проспективное исследование с включением 79 реципиентов аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК). В исследование были включены только пациенты в ремиссии острого лейкоза, 34% с острым лимфобластным лейкозом, 66% с острым миелобластным. В первой ремиссии ТГСК выполнялась 68% пациентов, во второй – 27%, в третьей – 5%. Двадцати шести пациентам выполнена ТГСК от родственного донора с источником трансплантата – костный мозг, 53 – выполнена неродственная ТГСК с источником трансплантата – стволовые клетки периферической крови. Профилактика РТПХ при родственных включала только ПТЦф 50 мг/кг в Д+3,+4 без дальнейшей иммуносупрессии, при неродственных – комбинацию ПТЦф, такролимуса и микофенолата мофетила. Медиана возраста составила 35 лет (диапазон 18-59). Было проведено расширенное исследование трансплантата методом проточной цитометрии (цитометр FACS ARIA II, моноклональные антитела Miltenyi biotec). Исследовалось наличие следующих популяций лимфоцитов: CD3, CD4, CD8, CD16CD56, NKT, iNKT, Т-регуляторы, дубль-позитивные Т-клетки, дубль-негативные Т-клетки, TCRalpha/beta, Т-клетки памяти TCR v11. Также исследовались замороженные образцы плазмы методом ИФА: VEGF A в Д0, растворимый рецептор к ФНОальфа, ИЛ-8, ИЛL-6, растворимый рецептор к ИЛ-2 (ИЛ-2Р) в Д+7, и ST2, ИЛ-17, растворимый рецептор к ФНОальфа в Д+21-30 (образец после приживления).

Результаты

При медиане наблюдения 15 месяцев общая выживаемость (ОВ) в исследуемой группе составила 79%, трансплантационная летальность – 6%, частота рецидивов – 20%, бессобытийная выживаемость – 75%, острая РТПХ II-IV степени – 13%, III-IV степени – 5%, хроническая РТПХ средней и тяжелой степени – 22%. Трансплантационная летальность в группе пациентов с РТПХ составила 0%. Несмотря на то, что в ROC анализе содержание Трег (AUC 0.608), CD4 (0.628) и iNKT (0.630) в трансплантате имели предиктивное значение, различия были не значимы из-за низкой частоты РТПХ (р>0.07). Прогностическим значением в отношении хронической РТПХ обладал ИЛ-17 при измерении на Д+30 (AUC 0.615, 57% против 29%, р=0.017). Наиболее прогностическими популяциями в трансплантате в отшении ОВ были CD3 (AUC 0.626), CD4 (AUC 0.628), CD8 (AUC 0.653), NKT (AUC 0.615), TCRalpha/beta (0.634), iNKT (0.615), iNKT CD8+ (0.613дубль-позитивные T-клетки (AUC 0.657). Прогностическая значимость цитокинов в отношении ОВ была ограничена, за исключением ИЛ-2Р (AUC 0.610). Различия в ОВ в основном были связаны с рецидивом основного заболевания. Например, содержание CD8 клеток в трансплантате >18% достоверно повышало вероятность рецидива (53% vs 12%, p<0.001). Такой же тренд наблюдался и для других популяций. Наблюдаемый фенотип со сниженной реакцией трансплантат-против-лейкоза наблюдался независимо от источника трансплантата (р=0.57), развития острой (р=0.37) или хронической РТПХ (р=0.50).

Заключение

Исследованные биомаркеры РТПХ обладали ограниченным прогностическим значением после родственных и неродственных ТГСК с ПТЦф, что связано с низкой частотой развития этого осложнения и нулевой РТПХ-ассоциированной летальностью. Тем не менее, было выявлено, что пацинты, которым выполнена трансфузия трансплантата с высоким содержанием эффекторных популяций лимфоцитов, имели повышенный риск рецидива после трансплантации. Биологическое обоснование этому феномену может быть получено в дальнейших исследованиях иммунной реконституции этих популяций.

Конфликт интересов

Данное исследование проведено при поддержке РФФИ, грант № 16-34-60142 мол_а_дк.

Ключевые слова

Трансплантация гемопоэтических клеток, реакция «трансплантат против хозяина», циклофосфамид, профилактика, биомаркеры, эффективность.


Возврат к списку