ISSN 1866-8836
Клеточная терапия и трансплантация

Определение гемопоэтических стволовых клеток в периферической крови и продукте афереза на гематологическом анализаторе Sysmex XN (XN-HPC): клинический случай

Татьяна С. Щеголева, Марина А. Городнова, Валентина М. Кравцова, Владислав С. Сергеев, Елена В. Бабенко, Мария А. Эстрина, Полина С. Куга, Ирина И. Кулагина, Марина О. Попова, Татьяна В. Андреева, Асмик Г. Геворгян, Людмила С. Зубаровская, Борис В. Афанасьев
Институт детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова

Загрузить версию в PDF

Клеточная терапия и трансплантация (КТТ)
Том 7, Номер 3
Contents 

Резюме

Введение

Рутинным методом определения количества гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) является проточная цитофлуориметрия с использованием меченых антител и витального красителя. К серьезным недостаткам данного метода можно отнести сложность стандартизации, отсутствие автоматизации, большие трудозатраты квалифицированного персонала, а также относительная дороговизна расходных материалов. В связи с высокой потребностью частого определения ГСК в периферической крови (ПК) и продуктах афереза существует необходимость разработки стандартизированных, автоматизированных методов. Sysmex-XN является использующимся в клинической практике гематологическом анализатором, имеющим все необходимые возможности для стандартизации проводящихся на нем исследований. В настоящее время разработана возможность определения количества ГСК на Sysmex-XN в канале WPC в режиме XN-HPC. Определение ГСК данным методом является исследовательским, но в перспективе может быть внедрено в клиническую практику в дополнение к рутинному методу в случае получения сопоставимых данных. Целью работы было сравнение данных по количественному определению ГСК в ПК и продукте афереза после мобилизации с помощью Г-КСФ двумя методами, а также трудовых и финансовых затрат.

Методы

В качестве стандарта использовался метод подсчета ГСК: подсчет лейкоцитов в камере Горяева и проточная цитофлуориметрия с маркерами CD45/CD34/7AAD (BD; San Jose, USA) на аппарате BD FacsCalibur по протоколу ISHAGE. Исследуемый метод – автоматизированный метод подсчета ГСК, доступный на анализаторах Sysmex XN (XN-HPC) в канале WPC, основанный на измерении размера, структуры и интенсивности флуоресценции клеток. Пробы ПК и продукта афереза забирались для исследований из одних образцов. Заготовка ГСК проводилась на сепараторе COBE Spectra.

Результаты

Представляется клинический случай пациентки Г., 2 г. 4 мес., рост 85,5 см., вес 15 кг, с диагнозом медуллобластома. Для лечения рецидива планируется высокодозная химиотерапии с аутотрансплантацией ГСК. Заготовка ГСК ПК проводилась после стимуляции Г-КСФ в дозе 10 мкг/кг однократно в течение 5-ти дней. На пятый день выполнен аферез. Объем перфузии составил 2900.0 мл, получено 230.0 мл концентрата. Результаты исследований представлены в таблицах: (1) количественное определение ГСК в ПК, (2) оценка количества ГСК в аферезном концентрате, (3) оценка финансовых и трудозатрат (без учета амортизации оборудования и коммунальных затрат).

Выводы

Представленный клинический случай демонстрирует, что результаты количественного определения ГСК на анализаторе Sysmex-XN сопоставимы с результатами рутинного метода, в то время как трудовые и финансовые затраты по меньшей мере в 3 раза ниже. Быстрота получения результата и относительно низкая стоимость позволяет предложить использование количественного определения ГСК на анализаторе Sysmex-XN в качестве дополнительного скринингового метода, результаты которого в дальнейшем будут валидироваться стандартным методом исследования. Внедрение нового скринингового метода определения ГСК приведет к оптимизации алгоритмов проведения афереза и, как следствие, получению трансплантатов ГСК лучшего качества. Тем не менее, для использования нового метода в клинической практике необходимо проведение сравнительных исследований по количественному определению ГСК в ПК и продуктах афереза от широкой когорты доноров/пациентов.

Ключевые слова

Гемопоэтические стволовые клетки, заготовка ГСК, периферическая кровь, продукт афереза, проточная цитометрия, Sysmex-XN, скрининг количества ГСК.

Таблица 1. Результаты исследований ПК

46_таблица 1.png

Таблица 2. Результаты исследований аферезного концентрата

46_таблица 2.png

Таблица 3. Оценка финансовых и трудозатрат

46_таблица 3.png

Возврат к списку