Исследование иммуномодулирующего эффекта леналидомида в терапии первой линии фолликулярной лимфомы

Резюме

Введение

Согласно современной концепции патогенеза лимфопролиферативных заболеваний, опухолевые клетки обладают способностью уклоняться от иммунного надзора и вызывать Т-клеточную анергию. Данный факт является оправданным для применения при лимфомах иммуномодулирующих средств, таких как леналидомид. Это способствует более вероятному формированию иммунного синапса за счет увеличения экспрессии ко-стимуляторных молекул на опухолевых В-клетках и усиления цитотоксической активности Т-клеток. Цель нашей работы состояла в изучении изменений экспрессии на опухолевых клетках PD-1, PD-L1, FAS, CD80, CD86, а также изменения в субпопуляциях Т-лимфоцитов во время терапии леналидомидом в первой линии при фолликулярной лимфоме. Клиническое описание и методы Пациент (м, 32 года) с фолликулярной лимфомой (2-й цитологический тип, IVB стадия, высокий риск по FLIPI-2). Проводилась терапия: в/в ритуксимаб 375 мг/м2, леналидомид с начальной дозой 5 мг/день с постепенной эскалацией до 20 мг/день в течение 27 дней. Терапия леналидомидом была отменена из-за сохраняющейся большой опухолевой массы, и начат курс R-CHOP. Образцы крови исследовали до и после введения ритуксимаба, на 1-й, 2-й, 5-й, 7-й и 21-й день терапии леналидомидом и на 3-й день после отмены. С помощью проточной цитометрии (цитометр BD FACS Canto II) определяли долю PD-1-, PD-L1-, FAS-, CD80-,CD86-позитивных клеток по отношению ко всем опухолевым клеткам. PD-1- и PD-L1-позитивные клетки определяли среди CD4 + и CD8 + T-клеток и определяли субпопуляции наивных (NV, CD28 + CD95-), эффекторных (EF, CD28-CD95 +) и клеток памяти (ME, CD28 + CD95 +). В качестве контроля исследовали кровь 29 доноров.

Результаты

До лечения доля CD4+PD-1+ Т-клеток составила 35,6% (у доноров 2,0-20,7%), CD8+PD-1+ Т-клеток - 23,6% (у доноров 1,8-23,5%). После введения ритуксимаба отмечалось
снижение доли CD4+PD-1+ клеток в 3,5 раза, до 10,8% и CD8+PD-1+ клеток в 2,5 раза, до 9,4%. На фоне терапии леналидомидом доля CD4+PD-1+ нарастала до 25%, а CD8+PD-1+ до 18,8% но не достигала исходных значений. После отмены леналидомида отмечалось значимое нарастание доли PD-1 на CD4+ Т – клетках до 44,9%. На второй день терапии леналидомидом доля CD4 + PD-L1 + увеличилась в 6,8 раза (от 0,5% до 3,4%), CD8 + PD-L1 + в 4 раза (от 0,3 до 1,2%). На 21-й день соответственно увеличились CD4 + PD-L1 + и CD8 + PD-L1 + до 4,4% и 2,5%. После отмены леналидомида доли CD4 + PD-L1 + и CD8 + PD-L1 + уменьшались до 1,1% и 0,5%, соответственно. Доля CD4 + ME клеток увеличилась с 42,9% до 70,6%, а количество CD4 + NV клеток снизилось с 56,4% до 27,9% во время терапии леналидомидом. После его отмены наблюдался рост количества наивных клеток до 32,8% и снижение ME до 66,2%. На 5-й день доля CD8 + EF клеток увеличилась с 19,3% до 59,9%. CD8 + EF лимфоциты достигли базового уровня в течение 3х дней после отмены леналидомида. Экспрессия ко-стимулирующих и ингибирующих антигенов на опухолевых клетках была низкой: CD80 + 1,9% (в В-клетках донора 0,0%-33,6%), CD86 + 3,9% (у доноров 0,0% -32,0%), FAS + 23% (У доноров 5,4% -38,0%), PD-1 0,7% (у доноров 0,0% -3,8%), PD-L1 + 19,1% (у доноров 5,6% -69,4%) до леналидомида. Во время терапии леналидомидом количество опухолевых клеток, экспрессирующих CD86, FAS, PD-L1, увеличилось до 50,8%, 33,9%, 57,6% и уменьшилось после его отмены до 23,3% 12,5%, 26,1%, соответственно. Экспрессия CD80 и PD-1 на опухолевых B-клетках не изменялась в течение всего периода терапии (Рис. 1).

Заключение

PD-L1 на опухолевых клетках приводит к анергии Т-клеток. Во время терапии леналидомидом увеличивалась доля PD-L1 + и снизилась PD-1 +Т-клеток, количество CD4 + ME и CD8 + EF лимфоцитов увеличивалось. Это указывает на активацию цитотоксического ответа и исчезновение анергии Т-клеток. С другой стороны, экспрессия ко-стимулирующих молекул на опухолевых клетках увеличивалась, однако экспрессия PD-L1 также увеличивалась. Таким образом, леналидомид обеспечил иммуномодулирующий эффект, но наличие остаточных опухолевых клеток в крови пациента указывает на способность опухолевых клеток избегать апоптоз иными способами.

Ключевые слова

Леналидомид, проточная цитометрия, иммунный ответ, фолликулярная лимфома.