Роль регуляторных Т-клеток в развитии раннего рецидива после высокодозной химиотерапии с аутологичной трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток у больных множественной миеломой

Резюме

Введение

Регуляторные Т-клетки (Трег) играют важную роль в патогенезе множественной миеломы (ММ), обеспечивая уход опухолевых клеток из-под иммунного надзора, которые, в свою очередь, способны индуцировать экспансию Трег. Однако данные об их содержании при различных фазах болезни и связи с эффективностью проводимой терапии неполны и противоречивы. Цель работы состояла в изучении динамики восстановления Трег у больных ММ в условиях истощения опухолевого клона и длительной лимфопении после высокодозной химиотерапии (ВДХТ) с аутологичной трансплантацией гемопоэтичекских стволовых клеток (АТГСК) и взаимосвязь между количеством Трег и течением посттрансплантационного периода.

Пациенты и методы

В исследование были включены 59 больных ММ, которым была проведена ВДХТ с АТГСК в 2009-2015 гг. Медиана возраста – 49 лет (32-64 года). Режим мобилизации – высокодозный циклофосфамид (4г/м2), либо курс стандартной химиотерапии и препарат Г-КСФ, режим кондиционирования – мелфалан 140-200 мг/м2 . Доза CD34+ гемопоэтических стволовых клеток – 5,9 ± 2,7 × 106 /кг (здесь и далее данные в виде М ± SD). Медиана наблюдения – 21 месяц. Количество циркулирующих CD4+FOXP3+ Трег оценивали методом проточной цитометрии (BD FACSCalibur, CellQuest Software) перед ВДХТ, в день выхода из лейкопении, через 6 и 12 месяцев после АТГСК. Для оценки значимости различий между группами больных использовали U-критерий Манна-Уитни. Для оценки диагностической значимости использовали ROC-анализ с расчетом площади под кривой. Различия считали достоверными при уровне значимости p < 0,05.

Результаты

Перед ВДХТ с АТГСК относительное количество CD4+FOXP3+ Трег составило 4,0 ± 3,0%. В отличие от других субпопуляций Т-лимфоцитов, относительное содержание Трег восстанавливалось уже ко времени выхода из лейкопении (в среднем, 14-й день после АТГСК) и было значимо выше предтрансплантационных значений (5,5 ± 3,3 %; pU=0,028), с дальнейшим снижением в течение года до 2,3 ± 1,3 %. Анализ исходов АТГСК в группе 36 пациентов показал, что рецидив или прогрессия ММ в течение первого года после ТГСК наблюдалась у семи больных. У этих пациентов относительное содержание CD4+FOXP3+ Трег на день выхода из лейкопении было более высоким по сравнению с пациентами, сохранившими ремиссию ММ (n=29): 7,9 ± 2,6 % против 4,6 ± 2,5 %; pU=0,0066. Относительное содержание Трег на других контрольных точках не отличалось у больных с ранним рецидивом и в ремиссии заболевания. Для определения прогностической значимости содержания Трег на момент восстановления лейкоцитов в прогнозе раннего исхода ТГСК был проведен ROC-анализ. Построение ROC-кривой выявило высокую информативность определения содержания Трег. Площадь под кривой относительного количества CD4+FOXP3+ Т-клеток в прогнозе развития рецидива в течение 12 мес. после АТГСК составила 0,835 (95 % ДИ: 0,678-0,992; р=0,0066). Относительное содержание CD4+FOXP3+ Т-клеток более 5,77 % позволяло прогнозировать неблагоприятный исход с чувствительностью 85,7 % и специфичностью 75,7%, отношение правдоподобия 3,55.

Заключение

Относительное содержание Трег у больных ММ после ВДХТ с АТГСК быстро (ко времени выхода из лейкопении) достигает и превышает предтрансплантационный уровень, после чего снижается и к исходу 12 мес. достигает нормативных значений. Развитие раннего рецидива заболевания после АТГСК ассоциируется с более высоким содержанием Трег ко времени выхода из лейкопении; оценка относительного содержания этих клеток по предварительным данным может быть использована для прогнозирования течения посттрансплантационного периода.

Ключевые слова

Множественная миелома, аутологичная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток, регуляторные Т-клетки, ранний рецидив