Значение экспрессии гена WT1 для прогноза рецидивов и выживаемости после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток у пациентов с острым миелоидным лейкозом

Резюме

Введение

Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) в настоящее время считается лучшим методом лечения ОМЛ с плохим прогнозом, который часто сопровождается посттрансплантационными рецидивами (ПТР). Среди ПТР могут быть молекулярные и цитологические варианты (мПТР и цПТР соответственно). Известно, что уровень экспрессии гена WT1 является хорошим индикатором массы продуцирующих его бластных элементов. С помощью этого теста имеется возможность ранней диагностики мПТР и оценка общей и бессобытийной выживаемости (ОВ и БСВ соответственно) и кумулятивной частоты рецидивов (КЧР) больных ОМЛ, леченных с использованием алло-ТГСК.

Пациенты и методы

Исследование включало 88 пациентов с ОМЛ в возрасте от 2 до 68 лет (медиана – 30 лет), которым была выполнена алло-ТГСК в нашем Центре в период с 2011 по 2017 годы. Уровни экспрессии гена WT1 измеряли серийно количественной ПЦР в реальном времени, а содержание бластов в тех же аспиратах костного мозга определяли в стандартно выбранных контрольных временных точках: перед трансплантацией (Д0) и в дни Д+30, Д+60 и Д+100 после ее выполнения. Пороговый уровень экспрессии гена WT1 был определен на основании измерения уровня экспрессии гена WT1 в аспиратах костного мозга здоровых доноров и равнялся 250 копиям WT1/10⁴ копий гена ABL. Во всех временных точках были сформированы группы больных с повышенным и нормализованным уровнями экспрессии гена WT1 (>250 копий <250 копий соответственно) и рассчитана разница в 2-летней ОВ, БСВ и КЧР. Поскольку повышение уровня экспрессии гена WT1, отражающее содержание секретирующих этот ген бластов, может опережать по времени определяемые морфологом цПТР, мы измерили этот временный интервал у всех обследованных больных ОМЛ и сопоставили его с проведенной посттрансплантационной терапией.

Результаты

Уровни экспрессии гена WT1 перед режимом кондиционирования варьировали от 0 до 56884 копий WT1/10⁴ копий гена ABL (медиана – 253 копии). По данным критериям лог-ранга, существенная разница в 2-летней ОВ, БСВ и КЧР между группами больных с повышенным и нормализованным уровнями экспрессии гена WT1 перед алло-ТГСК выглядела следующим образом: 79,5%, 69,8% и 28,2% против 31,8%, 22,7% и 58,9%, при p<0,001, p<0,001 и p=0,0019 соответственно. Различий в 2-летней ОВ, БСВ и КЧР между группами больных с повышенным и нормализованным уровнями экспрессии гена WT1 на день Д+30 после выполнения алло-ТГСК не было. Достоверные различия в 2-летней ОВ и КЧР наблюдались между этими группами на день Д+60 после выполнения алло-ТГСК (66,2% и 42,3% против 35,7% и 61,5% при p=0,012 и р=0,01 соответственно), в то время как достоверные различия в БСВ отсутствовали (52,3% против 38,5%, р=0,084). Наибольшие различия в 2-летней ОВ, БСВ и КЧР между группами больных с повышенным и нормализованным уровнями экспрессии гена WT1 имели место в контрольной временной точке Д+100 после алло-ТГСК (28,6%, 19% и 77,8% против 75,4%, 63,2% и 32,7% при р<0,001, р<0,001 и р<0,001 соответственно) (Рис.1). На основе пропорциональных рисков Кокса, независимое позитивное влияние на ОВ и БСВ сохранилось только для нормализованного во временной точке Д+100 после выполнения алло-ТГСК уровня экспрессии гена WT1 (р=0,011 и р=0,041) и наличия у больных хрРТПХ (р=0,038 и р=0,03). При этом отношение риска рецидива (125) было максимальным также на день Д+100. По нашим данным, мПТР и цПТР были зарегистрированы у 55/88 (62,5%) и 33/88 (37,5%) пациентов соответственно. У 33,3% пациентов (11/33) мПТР и цПТР по времени появления совпадали, в то время как в 22 наблюдениях цПТР отставали от мПТР на 13-321 день (медиана – 35). Задержка цПТР от мПТР частично может быть объяснено проводимой в клинике терапией, в частности, инфузиями донорских лимфоцитов и наличием у больных хронической РТПХ, что хорошо согласуется с данными литературы [Pozzi et al, 2013].

Заключение

Уровень повышенной и нормализованной экспрессии гена WT1 является удобным и полезным для клиники маркером молекулярно контролируемых ПТР и ремиссий ОМЛ. Оптимальной временной точкой для измерения уровня экспрессии гена WT1 в диагностике ПТР является Д+100, за которой, по мере снижения значимости, следуют Д0, Д+60 и Д+30. По нашим данным наудлинение продолжительности ОВ и БСВ сказывается также наличие у больных ОМЛ признаков хрРТПХ, что объясняется наметившуюся в клинике тенденцию лечить иммунотерапией диагностированные при серийном измерении уровни экспрессии гена WT1 мПТР [Di Grazia et al, 2016].

Ключевые слова

Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток, острый миелоидный лейкоз, WT1, рецидив, молекулярный мониторинг.