ISSN 1866-8836
Клеточная терапия и трансплантация

Влияние высокодозного циклофосфамида на реконституцию Т цитотоксических клеток памяти в костном мозге у больных после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток

Наталья Н. Попова, Михаил Ю. Дроков, Юлия О. Давыдова, Лариса А. Кузьмина, Николай М. Капранов, Анна А. Кучмий, Александр С. Вдовин, Екатерина Д. Михальцова, Дарья С. Дубняк, Вера А. Васильева, Ольга М. Королева, Зоя В. Конова, Ирина В. Гальцева, Григорий А. Ефимов, Елена Н. Паровичникова, Валерий Г. Савченко
ФГБУ Национальный медицинский исследовательский центр гематологии МЗ России, Москва, Российская Федерация

Загрузить версию в PDF

Клеточная терапия и трансплантация (КТТ)
Том 6, Номер 3
Contents 

Резюме

Введение

Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) является одним из наиболее эффективных методов лечения больных гемобластозами. Успех алло-ТГСК зависит от многих факторов, таких как возраст больного, коморбидность, режим кондиционирования и др. Однако, определяющим фактором успешной алло-ТГСК является реконституция иммунной системы. Т цитотоксические CD8+ клетки памяти в костном мозге представляют собой популяцию клеток, обеспечивающих противоопухолевый и противоинфекционный иммунный ответ. В данном исследовании показано влияние посттрансплантационного циклофосфамида (ЦФ) на реконституцию Т цитотоксических клеток памяти в костном мозге у больных после алло-ТГСК. Целью работы было изучение реконституции Т цитототоксических CD8+ клеток памяти в костном мозге у больных после алло-ТГСК.

Пациенты и методы

Для определения CD8+ клеток памяти были использованы образцы костного мозга (КМ) 19 больных с гемобластозами (муж. 9, жен. 10) на сроках +30, +60, +90 дней после алло-ТГСК. Медиана возраста больных 36 лет (20-60 лет). Алло-ТГСК была выполнена больным с ОЛЛ (n=3), ОМЛ (n=13), ЛПЗ (n=3). На момент алло-ТГСК 16 пациентов находились в ремиссии заболевания и 3 больным алло-ТГСК выполнена в прогрессии заболевания. Миелоаблативный режим кондиционирования применялся у 7 больных, режим пониженной интенсивности – у 12. В качестве иммуносупрессивной терапии использовались классические схемы (n=12) или применялся высокодозный циклофосфамид (ЦФ) на +3, +4 день в сочетании с другими иммуносупрессивными агентами (n=7): ЦсА+ММФ+МТХ+АТГ (n=11), ЦФ+АТГ (n=2), ЦсА+ММФ+ЦФ+АТГ (n=5), ЦсА+МТХ (n=1). Исследование образцов КМ для определения Т клеток памяти проведено с использованием метода проточной цитометрии (BD FACS Canto II, Becton Dickinson, USA). Для идентификации субпопуляций Т клеток памяти применялся стандартный протокол с использованием анти-CD8-APC-Cy7, анти-CCR7-PE-Cy7, анти-CD28-PE, анти-CD45R0-FITС антител (Becton Dickinson, USA): T наивные и T стволовые клетки памяти (Tnv+Tscm) – CD8+CD45R0-CCR7+CD28+; T клетки центральной памяти (Tcm) – CD8+CD45R0+CCR7+CD28+; T клетки транзиторной памяти (Ttm) – CD8+CD45R0+CCR7- CD28+; T клетки эффекторной памяти (Tem) – CD8+CD45R0+CCR7-CD28-; T терминальные эффекторы (Tte) – CD8+CD45R0-CCR7-CD28-. Для исключения из анализа мертвых клеток применялся 7-AAD. Для оценки различий между двумя независимыми выборками использовался U-критерий Манна-Уитни. Значение р<0,05 считалось статистически значимым. Весь анализ данных проводился с использованием SPSS ver 23. (IBM, Chicago, Ill., USA).

Результаты

По данным проведенного исследования, в этих подгруппах больных получено значимо меньшее количество наивных и стволовых CD8+ клеток памяти (Tnv+Tscm) в костном мозге у пациентов в течение первых 100 дней после алло-ТГСК, получивших с целью индукции толерантности высокодозный ЦФ на +3,+4 день, в сравнении с классическими схемами иммуносупрессивной терапии (р<0.05). Полученные данные представлены в таблице 1.

Заключение

Наивные и стволовые CD8+ клетки памяти (Tnv+Tscm) представляют собой самостоятельную субпопуляцию клеток в костном мозге, которые способны к антигеннезависимой пролиферации, что является ключевым моментом в реализации вторичного (адоптивного) иммунного ответа. В данном исследовании показано влияние посттрансплантационного ЦФ, используемого в режимах профилактики РТПХ, на Т цитотоксические клетки памяти. Вероятно, малое число наивных и стволовых CD8+ клеток памяти (Tnv+Tscm) в костном мозге после использования ЦФ является ключевым фактором в механизме профилактики РТПХ. Однако этот факт может иметь значение и в развитии как инфекционных осложнений, так и рецидивов заболевания после алло-ТГСК.

Ключевые слова

Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток, клетки памяти костного мозга, Т цитотоксические клетки, реконституция иммунной системы, высокодозный циклофосфамид.

Возврат к списку