Влияние экстракорпорального фотофереза на основ- ные субпопуляции лимфоцитов крови у пациентов с хронической реакцией трансплантат против хозяина
Юлия О. Давыдова, Вера А. Васильева, Николай М. Капранов, Екатерина Д. Михальцова, Ирина В. Гальцева, Татьяна В. Гапонова, Лариса А. Кузьмина, Елена Н. Паровичникова, Валерий Г. Савченко
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, РФ
Резюме
Введение
В настоящее время экстракорпоральный фотоферез (ЭКФФ) занимает уверенные позиции в терапии пациентов после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК), в рамках лечения острой и хронической реакции трансплантат против хозяина (РТПХ). ЭКФФ обладает иммуномодулирующим воздействием, способствуя элиминации иммунных клеток, участвующих в патогенезе хронической РТПХ. Однако остается не до конца изученным влияние ЭКФФ на субпопуляции лимфоцитов крови пациента. Цель работы состояла в изучении изменений абсолютного количества Т-хэлперов, цитотоксических Т-клеток, В-клеток и NK-клеток у пациентов с хронической РТПХ, проходящих терапию ЭКФФ.Пациенты и методы
Проведено исследование образцов крови 10 пациентов с гемобластозами после алло-ТГСК с экстенсивной формой хронической РТПХ (6 женщин, 4 мужчины, медиана возраста 45 лет). Исследование субпопуляций лимфоцитов проводилось в периферической крови пациентов до первой процедуры ЭКФФ и через месяц терапии после 4 процедур ЭКФФ. Определяли абсолютное количество Т-хэлперов (CD3+CD4+), цитотоксических Т-клеток (CD3+CD8+), В-клеток (CD19+) и NK-клеток (CD3-CD56+) на проточном цитометре BD FACS Canto II. Отличия между связанными выборками определялись с помощью критерия Вилкоксона. Статистическая обработка данных проводилась с помощью GraphPad Prism.Результаты
До выполнения ЭКФФ количество Т-хэлперов выше референсного интервала наблюдалось у 4 пациентов (40%), цитотоксических Т-клеток – у 9 (90%), В-клеток – у 4 (40%) и NK-клеток – у 6 (60%). После проведения 4-х процедур ЭКФФ снижение количества Т-хэлперов до значений референсного интервала произошло у 3 из 4 пациентов с увеличенным их количеством, цитотоксических Т-клеток – у 6 из 8, NK-клеток – у 5 из 6, снижения количества В-клеток не происходило. При анализе абсолютного количества различных субпопуляций лимфоцитов статистически значимое снижение после курсов ЭКФФ наблюдалось только среди цитотоксических Т-клеток (Табл. 1) не зависимо от того, было ли их количество выше верхней границы референсного интервала до ЭКФФ.Выводы
В данном исследовании показано, что после проведения 4-х процедур ЭКФФ происходило достоверное снижение абсолютного количества цитотоксических т-клеток, тогда как значимого изменения Т-хэлперов, В-клеток и NK-клеток не происходило. Необходимо продолжить исследование на большей когорте пациентов.
Ключевые слова
Экстракорпоральный фотоферез, реакция трансплантат против хозяина, трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, субпопуляции лимфоцитов, проточная цитометрия.