Оценка химеризма в CD3+ клеточной популяции у пациентов с острым миелобластным лейкозом (ОМЛ) после аллогенной ТГСК с TCR a/b деплецией
Варвара В. Бриллиантова, В. О. Бобрынина, Елена В. Райкина, Михаил А. Масчан, Л. Н. Шеховцова, Дмитрий Н. Балашов, Павел Е. Трахтман, Елена Е. Курникова
ФНКЦ детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Д. Рогачева, Москва, Россия
Резюме
Введение
Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК) при многих заболеваниях является единственным способом спасти жизнь пациента. Особенно важную роль эта процедура играет в онкогематологии. ТГСК сопряжена со множеством опасностей, таких как отторжение трансплантата, развитие инфекционных осложнений, развитие реакции трансплантата против хозяина (РТПХ), а также развитие рецидива основного заболевания. Для того, чтобы отслеживать, как происходит процесс восстановления донорского кроветворения у реципиента, приживление и функционирование трансплантата используется измерение химеризма (количества собственных клеток реципиента) в крови и костном мозге после трансплантации. При использовании TCRab-деплеции (удалении иммунокмпетентных клеток – Т-лимфоцитов из донорского трансплантата перед пересадкой) в дальнейшем у пациентов, в ряде случаев, длительное время сохраняется высокий процент собственных клеток, особенно в CD3+ фракции клеток. В связи с этим появилась необходимость понять, является ли смешанный химеризм в CD3+ клетках после трансплантации неблагоприятным фактором риска. Цель работы состояла в оценке динамики химеризма в CD3+ клетках у пациентов с ОМЛ после ТГСК с TCR a/b деплецией от гаплоидентичных и неродственных доноров.Пациенты и методы
Выборку составили пациенты с диагнозом ОМЛ, прошедшие аллогенную трансплантацию гемопоэтических стволовых клеток с TCR a/b деплецией в период с февраля 2012 года по май 2015 года (n=42). Трансплантацию от гаплоидентичного донора получили 18 пациентов, от HLA-совместимых неродственных доноров – 23 пациентов. Измерение химеризма проводилось каждые 30 дней в течение года. За время наблюдения рецидив развился у 15 человек. Химеризм определяли в CD3+ клетках, выделенных методом магнитной сепарации на магнитных частицах Dynabead (Life Technologies) из образцов костного мозга, дальнейший анализ проводили методом ПЦР в режиме (реального времени с использованием реактивов для ПЦР (ООО «Центр медицинской генетики») и специально подобранныв праймеров, специфичных к участкам ДНК с полиморфизмами Insertion/Deletion («Евроген», «Синтол»).Результаты
Пациенты, получившие ТГСК от неродственного донора, характеризовались более высоким количеством собственных клеток в CD3+ клетках, начиная с 90 дня после ТГСК и до 150 дня, по сравнению с пациентами после ТГСК от гаплоидентичного донора (р<0,05). После 150 дня значимые различия в химеризме CD3+ исчезали. Более высокий уровень химеризма у пациентов после неродственной ТГСК не коррелировал с развитием рецидива в этой группе.Выводы
Трансплантация с TCR a/b деплецией от совместимых неродственных доноров характеризуется более высоким процентом собственных клеток в CD3+ линии после трансплантации по сравнению с пациентами, получившими ТГСК от гаплоидентичных доноров (р<0,05). Более высокое количество собственных клеток в CD3+ линии после 90 дня от неродственной ТГСК не характеризует более высокий риск развития рецидива в этой группе больных.Ключевые слова
Острый миелобластный лейкоз, трансплантация гемопоэтических стволовых клеток, CD3+ клетки, смешанный химеризм, риск рецидива.