PI-07. Частота выявления герпесвирусов в биоптатах слизистой оболочки толстой кишки у больных с кишечной патологией после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток

Резюме

Кишечные синдромы часто встречаются после аллогенной ТГСК в связи с острой реакцией «трансплантат-против-хозяина» (оРТПХ) и/или инфекционных осложнений. В дальнейшем они могут проявляться оверлап-синдромом, сочетающим черты острой и хронической РТПХ. Ранняя реактивация герпесвирусов часто отмечается после интенсивной цитостатической терапии и ТГСК. Целью нашего исследования была оценка частоты выявления цитомегаловируса (ЦМВ), вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ), вируса герпеса человека типа 6 (ВГЧ6) и вируса простого герпеса (ВПГ) в биоптатах слизистой оболочки толстой кишки в течение первых 180 дней после ТГСК, а также их возможная ассоциация с наиболее частыми клиническими осложнениями.

Материалы и методы

Мы обследовали 119 пациентов (в возрасте от 1 года до 72 лет), поступивших в НИИ им. Р. Горбачевой для алло-ТГСК с 2014 по 2020 год с первичными диагнозами. Первичный острый миелоидный лейкоз (n=34), острый лимфобластный лейкоз (n=36), лимфогранулематоз (n=10), тяжелые апластические анемии (n=15). Выполнялись следующие виды ТГСК: гаплоидентичная родственная (48%), аллогенная неродственная (41%) или аллогенная родственная ТГСК (11%). Стволовые клетки костного мозга или периферической крови трансплантировали, соответственно, в 42 и 58% случаев. Миелоаблативное кондиционирование применялось у 57% пациентов. Посредством диагностической фиброколоноскопии, у больных с кишечными синдромами были взяты 155 диагностических щипцовых биопсий слизистой оболочки толстой кишки. Эндоскопию проводили при тяжелых резистентных к терапии кишечных синдромах. Наличие кишечной формы РТПХ или кишечных инфекций оценивали с помощью клинических критериев и гистологического исследования биопсий. Большинство биоптатов были взяты из нисходящей и сигмовидной кишки (52%), поперечной ободочной (25%), восходящей ободочной кишки (10%), слепой кишки (5%), подвздошной кишки (5%). Все пациенты дали информированное согласие на медицинские процедуры (ТГСК и эндоскопию). Образцы слизистой (от 3 до 6 образцов) исследовали методом стандартной гистологии с иммунодиагностикой некоторых вирусных антигенов. ПЦР-диагностика герпесвирусов (ЦМВ, ВПГ и ВГЧ6 A/B) в образцах слизистой оболочки толстой кишки тестировали с помощью коммерческих ПЦР тест-систем. Результаты считали положительными или отрицательными при установленной чувствительности 400-1000 копий гена/мл (в зависимости от типа вируса). Статистическую оценку проводили с помощью программного обеспечения Statistica 10 с использованием как параметрических, так и непараметрических критериев.

Результаты

Положительные тесты на ВПГ в слизистой оболочке толстой кишки были редки (до 8% через 2-3 месяца после трансплантации). Высокая частота ВГЧ6 (в среднем 62%) была выявлена в течение 6 мес., тогда как реактивация ЦМВ в биоптатах была существенно ниже (28-35%) в течение 4 мес. после ТГСК. Частота обнаружения ВЭБ достоверно возрастала в более поздние сроки (до 5-6 мес. после ТГСК). В одновременно взятых образцах крови и биоптатов частота обнаружения HHV6 в слизистой оболочке толстой кишки была значительно выше, чем в образцах крови (соответственно, 59% и 18%, p<0,04). Процент обнаружения ЦМВ и ВЭБ был одинаковым в образцах толстой кишки и крови. Значимая корреляция была обнаружена между выявлением вирусов в крови и слизистой толстой кишки, как в отношении ЦМВ, так и ВЭБ (r=0,489 и r=0,583; p<0,05). В поисках возможных ассоциаций между положительными результатами биопсии слизистой оболочки и характеристиками пациентов, мы не выявили каких-либо существенных корреляций с большинством демографических и клинических характеристик пациентов, включая возраст, пол или первичный диагноз пациентов. Тем не менее, мы выявили значительную связь между заболеваемостью ВЭБ и осложнениями ТГСК. Например, более высокие показатели обнаружения ВЭБ в слизистой оболочке толстой кишки коррелируют с длительным приживлением костного мозга с точки зрения замедленного восстановления числа лейкоцитов и тромбоцитов. Кроме того, повышенная частота EBV-положительных биопсий толстой кишки была обнаружена у умерших пациентов с кишечными синдромами (соответственно, 56% против 21%, p=0,02).

Заключение

Достоверная корреляция между частотой ВЭБ в крови и биоптатах кишечника предполагает наличие связи между системной и локальной реактивацией ВЭБ. Более того, посттрансплантационное восстановление кроветворения, по-видимому, связано с локальной реактивацией ВЭБ, что подтверждает особую роль ВЭБ в посттрансплантационных осложнениях в течение 6 месяцев после трансплантации.

Работа поддержана грантом Российского Научного Фонда (№ 22-15-00149 от 18.05.2022 г.)

Ключевые слова

Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток, слизистая толстой кишки, биопсия, герпесвирусы, частота выявления, клинические ассоциации.