GC-02. Устойчивость к анти-CD19 CAR-T-клеточной терапии: Описание клинического случая

Резюме

Первичная резистентность к CAR T-клеточной терапии у детей с В-линейным острым лимфобластным лейкозом (В-ОЛЛ) наблюдается с частотой до 20% случаев [Atilla PA, 2022]. Причиной данного явления может быть, как сниженная функциональная активность CAR-Т-клеток, так и биологические особенности опухолевого клона. В Центре детской онкологии, гематологии и иммунологии (РНПЦДОГИ) анти-CD19 CAR T-терапия была проведена для 8 пациентов с В-ОЛЛ, у одного из которых наблюдали резистентность к данной терапии.

Материалы и методы

Мальчик в возрасте 7 лет поступил в РНПЦДОГИ, где был установлен диагноз В-ОЛЛ с наличием перестройки MLL (KMT2A) гена (MLL-AF9), BIII иммунофенотип с положительной экспрессией NG2, CD33, CD65 и СD15. После проведения терапии согласно протоколу ALL-MB-2015 была достигнута непродолжительная ремиссия, за которой последовал ранний I изолированный (КМ) рецидив. При рецидиве опухолевые клетки сохраняли MLL-AF9 перестройку, но соответствовали BI иммунофенотипу с экспрессией CD33 и СD15. После курса противорецидивной терапии пациент не достиг ремиссии, развил химиорезистентность, вследствие чего было принято решение о проведении анти-CD19 CAR-Т-терапии. Учитывая высокую опухолевую нагрузку (93% бластных клеток в костном мозге) и общее состояние пациента, CAR Т-клетки вводили дробно в количестве 10% и 90% от расчетной дозы (1×10⁶ клеток/кг) с интервалом 7 суток. Иммуномониторинг не выявил значимой экспансии CAR-T-клеток в организме реципиента. Пиковое содержание CAR T-клеток в периферической крови составило 0,05 клеток/мкл, тогда как значение медианы пикового уровня CAR T-клеток для остальных 7 пациентов составило 17 (1,7-224) клеток/мкл. Несмотря на проведенную иммунотерапию наблюдали рост содержания бластных клеток в костном мозге и периферической крови. При иммунофенотипировании на стадии прогрессии был выявлен смешанный фенотип (В/My) лейкемических клеток. Спустя 30 суток после последнего введения CAR Т-клеток пациент умер от прогрессирования основного заболевания.

Результаты

Известно, что особенности CAR Т-клеточного продукта влияют на эффективность терапии. Так, высокое содержание терминально дифференцированных, истощенных Т-клеток в конечном продукте снижает их способность к экспансии/персистенции. В клеточном продукте, полученном для описываемого пациента, содержание CCR7-позитивных клеток составило 84% и 90% для CD4 и CD8 CAR T-клеток соответственно. Также была подтверждена высокая цитотоксическая активность CAR Т-клеток пациента в тесте in vitro, как в отношении модельной клеточной линии, так и собственных опухолевых клеток реципиента. Согласно литературным данным смешанный фенотип лейкемических клеток (CD19, CD20, CD33, CD34), наблюдаемый и в описываемом случае, с высокой частотой встречается среди пациентов, не отвечающих на CAR T-терапию [KE Masih, 2022]. Еще одним из описанных ранее механизмов первичной резистентности является возникновение мутаций в гене, кодирующем белок CD58, либо снижение его экспрессии на поверхности опухолевых клеток [RG Majzner, 2020, Xin Yan, 2022]. CD58 является лигандом для костимуляторной молекулы CD2, и нарушение их взаимодействия приводит к формированию неэффективного иммунологического синапса между CAR Т-лимфоцитом и опухолевой клеткой из-за чего снижается функциональная активность CAR Т-клеток и их способность к экспансии. Нормализованный относительно здоровых лимфоцитов коэффициент экспрессии CD58 на поверхности опухолевых клеток пациента составил 0,95. При этом, медианное значение для аналогичного показателя в группе пациентов с эффективной экспансией CAR T-клеток составило 2,46 (1,2-6,56).

Вывод

Таким образом, описанный случай резистентности В-ОЛЛ к анти-CD19 CAR T-терапии можно объяснить выявленными особенностями лейкемических клеток пациента: смешанный иммунофенотип (B/My), наличие перестройки с участием гена MLL, сниженный уровень (отсутствие) экспрессии СD58.

Ключевые слова

CAR Т-клеточная терапия, В-ОЛЛ, первичная резистентность, CD58.