ISSN 1866-8836
Клеточная терапия и трансплантация

GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата

Татьяна Н. Беловежец, Андрей А. Горчаков, Сергей В. Кулемзин

Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия

doi 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148

Резюме

Выраженная клиническая активность CD19-специфичной CAR T-клеточной терапии обеспечила активные исследования в области адоптивной клеточной иммунотерапиии онкологических заболеваний человека и привела к одобрению FDA 5 препаратов. Вместе с тем становится понятно, что необходимо дальнейшее улучшение данного подхода, а именно, обеспечение хоминга и долговременной персистенции, расширение спектра мишеней, снижение стоимости, переход к аллогенному формату. В настоящей работе было проведено сравнение in vitro и in vivo трех различных CD20-специфичных CAR T-клеток с референсным CD19-специфическим CAR на основе антитела FMC63 (Kymriah), первым допущенным к клинической практике.

Материалы и методы

Были получены лентивирусные конструкции, кодирующие CAR с антиген-распознающими доменами от мышиных антител 1F5, Leu16 и человеческого антитела – офатумумаб (2F2). Полученные конструкции отличались только антигенраспознающим доменом. Затем были получены CAR T-клетки из периферических Т-клеток здорового донора и проверена их активность.

Результаты

В первую очередь был оценен уровень экспрессии всех полученных CAR на поверхности клеток при помощи проточной цитометрии. Полученные CAR T-клетки проявляли одинаковую цитотоксичность в 4-х часовом тесте против клеток-мишеней линии Nalm6, эктопически экспрессирующих CD20 (рис. 1). Скорость пролиферации CAR T-клеток с антигенраспознающими районами от 1F5 и FMC63 была примерно в 1,5 раза выше всех остальных CAR T-клеток. В тесте на повторяющуюся цитотоксичность CAR T-клетки на основе 1F5 и Leu16 показали более перспективные результаты (рис. 2). Все полученные CAR T-клетки контролировали ксенотрансплантированую опухоль в мышах линии NOD. Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ достоверно лучше, чем нерелевантные CAR T-клетки (специфичные к PSMA) (рис. 3).

Выводы

Таким образом, все полученные CAR Т-клетки проявляют выраженную активность в модельных экспериментах in vitro и in vivo. Основываясь на полученных данных, можно сделать прогноз о перспективности применения таких CAR T-клеток в клинике в моно- или биспецифичном формате.

Исследование было поддержано грантом РФФИ №19-415-543015 р_мол_а.

Ключевые слова

Т-клетки, химерные антигенные рецепторы, терапия CAR T-клетками, офатумумаб.


Том 10, Номер 3
30.09.2021

Загрузить версию в PDF

doi 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148

Возврат к списку