ISSN 1866-8836
Клеточная терапия и трансплантация

Геномная точка разрыва в MLL и генах-партнерах: взаимосвязь с клиническими характеристиками и исходами терапии у детей первого года жизни с острыми лейкозами

Григорий А. Цаур1, Клаус Майер2, Анатолий М. Кустанович3, Александр М. Попов1, Татьяна О. Ригер1, Елена В. Флейшман4, Ольга И. Сокова4, Юлия В. Ольшанская5, Елена А. Матвеева6, Ольга В. Стренева1, Егор В. Шориков1, Леонид И. Савельев1, 6, Рольф Маршалек2, Лариса Г. Фечина1

1 Областная детская клиническая больница №1, Институт Медицинских клеточных технологий,

Екатеринбург, Российская Федерация

2 Диагностический центр острых лейкозов, Институт Фармацевтической биологии/ЗАФЕС, Университет имени В. Гете Франкфурта-на-Майне, Франкфурт-на-Майне, Германия

3 Республиканский центр детской онкологии, гематологии и иммунологии, Минск, Беларусь

4 Российский онкологический научный центр им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва, Российская Федерация

5 Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Д. Рогачева, Москва, Российская Федерация

6 Уральский государственный медицинский университет, Екатеринбург, Российская Федерация

Резюме

Цель

Оценить взаимосвязь между локализацией точек разрыва в геномной ДНК гена MLL и генов-партнеров с клиническими характеристиками острых лейкозов (ОЛ) у детей первого года жизни.

Методы

В исследование было включено 87 детей первого года жизни (32 мальчика и 55 девочек с медианой возраста 4,9 мес) с MLL-позитивным острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ) (n=63), острым миелоидным лейкозом (ОМЛ) (n=22), острым лейкозом смешанной линейности (n=2). Точка разрыва в геномной ДНК гена MLL и генов-партнеров была определена методом длинной инвертированной ПЦР. Нумерация экзонов и интронов гена MLL дана по работе I. Nilson et al, 1996.

Результаты

Наиболее частым химерным геном (ХГ) выявленным у пациентов с ОЛЛ был MLL-AF4 (n=35, 55%), реже выявлялись MLL-MLLT1 (n=13, 21%), MLL-MLLT3 (n=8, 13%) и другие ХГ. Наиболее частой точкой разрыва в ДНК гена MLL у пациентов с ОЛЛ являлся интрон 11 (n=31, 49%), менее часто разрывы локализовались в интроне 10 (n=13, 21%) и интрон 9 (n=9, 14%). Наибольшая вариабельность точек разрыва в ДНК гена MLL наблюдалась при наличии ХГ MLL-AF4: только 15 из 35 (43%) имели точку разрыва в интроне 11. Наиболее стабильный рисунок был характерен для пациентов с ХГ MLL-MLLT1: в 9 из 14 случаев (64%) точка разрыва локализовалась в интроне 11. У пациентов с ОМЛ наиболее частым ХГ являлся MLL-MLLT3 (n=8, 36%), а самой частой точкой разрыва в геномной ДНК гена MLL – инрон 9 (n=10, 45%), реже обнаруживались точки разрыва в интронах 10 (n=5, 23%) и 11 (n=4, 18%). Наибольшая стабильность точек разрыва в ДНК гена MLL показана для ХГ MLL-MLLT10: 4 из 5случаев (80%) в интроне 9. Среди генов-партнеров MLL наиболее частыми локализациями точек разрыва являлись: в гене AF4 – интрон 3 (n=25, 69%) и 4 (n=7, 19%), в гене MLLT1 – некодирующий регион между генами ACER1 и MLLT1 (n=9, 60%) и интрон 1 (n=5, 33%), в гене MLLT3 – интрон 5 (n=13, 81%), в гене MLLT10 – интроны 8 и 9 (n=2, 33% в обоих случаях), в гене EPS15 – интрон 1 (n=3, 75%). Расположение точек разрыва в генах-партнерах MLL было сходным при ОЛЛ, ОМЛ и ОЛ смешанной линейности. Пациенты с ОЛЛ, у которых точка разрыва располагалась в интроне 11, были младше всех остальных (3,1 и 5,6 мес, соответственно, p=0,035), в первую очередь благодаря разнице в возрасте с пациентами с точкой разрыва в интроне 9 (6,6 мес, p=0,040). У пациентов с ОМЛ не было найдено взаимосвязи между возрастом, полом, инициальным лейкоцитозом, типом гена-партнера и распределением точек разрыва в ДНК гена MLL. При оценке прогностической значимости локализации точек разрыва в ДНК гена MLL у 46 детей первого года жизни с ОЛЛ, включенных в исследование MLL-Baby, было показано, что 5-летняя бессобытийная выживаемость (БСВ) у пациентов с точкой разрыва в 11 интроне (n=29) была достоверно ниже, чем у пациентов c локализацией точек разрыва, начиная с 7 интрона по 11 экзон (n=17) (0,16±0,07 и 0,38±0,14 p=0,039). Одновременно с этим кумулятивная вероятность развития рецидива была значительно выше в группе с точкой разрыва в 11 интроне (0,74±0,09 и 0,52±0,17 p=0,045). Медиана времени наблюдения составила 36 месяцев (диапазон 20-94 мес). В то же время при проведении многовариантного регрессионного анализа по методу Кокса с включением в модель точки разрыва в 11 интроне, возраста, иммунофенотипа, инициального лейкоцитоза, инициальной нейролейкемии, типа перестройки гена MLL, абсолютного количества бластных клеток на 8 день профазы и минимальной остаточной болезни (МОБ) в точке наблюдения 4 (ТН4) было показано, что единственным значимым фактором остается сохранение МОБ в ТН4 (Отношение опасности 5,994, 95% ДИ 2,209-16,263, p<0,001).

Заключение

Среди генов-партнеров MLL наиболее стабильное распределение точек разрыва в гене MLLT1, наиболее гетерогенное – в генах AF4 и MLLT10. Самой частой точкой разрыва ДНК гена MLL у детей первого года жизни с ОЛЛ являлся интрон 11, при ОМЛ – интрон 9. При ОЛЛ у детей первого года жизни, получавших лечение по протоколу MLL-Baby, наличие точки разрыва в ДНК гена MLL в интроне 11 вело к достоверно более низким показателям БСВ и более высокой кумулятивной вероятности развития рецидива. Однако в многофакторной модели риска единственным значимым показателем оставалось сохранение МОБ в ТН4. Таким образом, представленные данные дают дополнительную информацию о молекулярно-генетических характеристиках ОЛ, ассоциированных с перестройками гена MLL.

Ключевые слова

острый лейкоз, дети первого года жизни, перестройки 11q23/mll, mll-baby, исходы терапии


Том 5, Номер 1
01.03.2016

Загрузить версию в PDF

Возврат к списку